Оптический микроскоп

«Большой микроскоп» от Carl Zeiss 1879 года с оптикой, рассчитанной Эрнстом Аббе .

Световые микроскопы (от греческого μικρόν micrón «маленький» и σκοπεῖν skopein «смотреть на что-то») - это микроскопы, которые с помощью света создают значительно увеличенные изображения небольших структур или объектов . Увеличение происходит в соответствии с законами оптики за счет преломления света на стеклянных линзах .

Чтобы можно было распознавать структуры в созданном изображении, изображение должно содержать достаточный контраст, который присутствует во многих биологических объектах, таких как B. срезы тканей или мелкие водные организмы практически отсутствуют. «Типичной» микроскопической процедурой для таких объектов является светлопольная микроскопия , в которой контраст обусловлен цветными или темными структурами в освещенном образце, усиленными, если необходимо, дополнительным искусственным окрашиванием объекта. В случае бесцветных образцов контраст также может быть создан с помощью специальных методов освещения путем преобразования разницы в оптической плотности (показателя преломления) в различия в яркости. Это происходит с микроскопией темного поля , фазово-контрастной микроскопией и с дифференциальным интерференционным контрастом (ДИК) или с методом наклонного освещения, который уже использовался на заре микроскопии. Различия в поляризационном поведении образца используются в поляризационной микроскопии . Флуоресцентные структуры в образце являются предпосылкой для флуоресцентной микроскопии и ее многочисленных специальных процедур. Другие методы микроскопии - конфокальная микроскопия и многофотонная микроскопия . Все эти процедуры описаны в отдельных статьях. В статье представлены общие принципы различных микроскопических процедур.

Как работают простые и сложные микроскопы

Световая микроскопия может выполняться с помощью «простых» или «сложных» микроскопов. Современные микроскопы, как правило, представляют собой «сложные микроскопы».

Простые микроскопы

Копия микроскопа Ван Левенгука. Подробности см. В тексте.

Простые микроскопы имеют только одну оптическую систему для увеличения и работают как увеличительное стекло (принцип увеличения см. Там). Первоначально для этого использовалась только одна стеклянная линза . Чтобы добиться большого увеличения, типичного для микроскопов, требуется очень короткое фокусное расстояние. Из-за связанной с этим сильной кривизны поверхности линзы линза должна иметь небольшой диаметр в миллиметровом диапазоне. Его необходимо держать близко к глазу на соответственно небольшом расстоянии, что утомительно и привело к тому, что эти микроскопы практически не используются. В простейшем случае простой микроскоп состоял только из стеклянной линзы и держателя для нее.

Самыми известными, вероятно, являются устройства, созданные Антони ван Левенгук , с помощью которых достигается увеличение более чем в 200 раз. Этим он сделал множество научных открытий в конце 17 века. Реплика такого микроскопа, показанная на рисунке, держится стороной, лежащей на поверхности, близко к глазу. Справа от рисунка, в конце ромба, можно увидеть наконечник, на который был установлен образец и приведен в положение наконечником с помощью винтовой резьбы. Ниже стеклянная линза встроена в металлическую пластину.

Со временем были разработаны многочисленные варианты простых микроскопов, такие как Б. «Блошиное стекло», компасный микроскоп, простые винтовые микроскопы, классические препаровальные микроскопы и так называемые ботанические микроскопы. В поисках лучшего качества изображения линзы из драгоценных камней также использовались в 19 веке из-за их высокого показателя преломления и, следовательно, более низкой сферической аберрации, или комбинации двух или трех плоско-выпуклых линз (дублет, триплет) также для уменьшения ошибок изображения. Были также простые микроскопы с комбинированными одиночными линзами с винтовыми креплениями для изменения увеличения. Такие простые микроскопы предлагались до конца 19 века. Например, после основания компании в Йене, начиная с 1850-х годов, Zeiss производила дублеты до 125-кратного увеличения и триплеты до 300-кратного увеличения, а в 1895 году еще один дублет до 70-кратного увеличения.

Поскольку простой микроскоп с большим увеличением необходимо держать близко к глазу, образец обычно можно освещать только сзади. Как правило, используется проходящий свет. С тех пор, как Иоганн Либеркюн (1740 г.) изобрел вогнутое освещающее зеркало, которое окружает линзу и направлено на объект, появилась возможность освещения падающим светом. Простые «естественные микроскопы» с меньшим увеличением в то время были в основном микроскопами отраженного света.

Двухступенчатое увеличение с помощью составного микроскопа

Двухступенчатое увеличение с помощью составного микроскопа

Комбинированные микроскопы состоят как минимум из двух последовательно соединенных оптических систем, каждая со своим увеличением. Передняя линза , то цель , создает увеличенное действительное изображение , то промежуточное изображение , которое увеличен во второй раз с помощью окуляра . Окуляр работает как увеличительное стекло и создает виртуальное изображение промежуточного изображения . Общее увеличение микроскопа является продуктом объективного увеличения и окуляр увеличения. С 20-кратным объективом и 10-кратным окуляром общее увеличение составляет 200 крат.

Первые составные микроскопы состояли только из двух отдельных линз, и очень скоро окуляр состоял из двух линз, чтобы увеличить используемое поле изображения и уменьшить аберрации (например, окуляр Гюйгенса ). В современных микроскопах объективы и окуляры состоят из нескольких линз для компенсации различных оптических аберраций . Речь идет о хроматической аберрации, которая была ограничена только в 19 веке с введением новых типов стекла. Поскольку аберрации объектива и окуляра многократно увеличиваются, составные микроскопы изначально уступали простым микроскопам. Объективы и окуляры обычно взаимозаменяемы, поэтому увеличение можно адаптировать к конкретной задаче.

Композитные конструкции микроскопов

Микроскопия в проходящем или отраженном свете

В зависимости от стороны, с которой свет падает на образец, различают падающий и проходящий свет или микроскопию падающего и проходящего света.

В микроскопии в проходящем свете свет проходит через образец сзади, прежде чем попадет в объектив микроскопа (оранжевые стрелки на схеме). Поэтому требуются прозрачные или тонко нарезанные препараты. Этот метод используется в наиболее распространенном микроскопическом методе - микроскопии в светлом поле в проходящем свете .

В микроскопии отраженного света свет либо направляется от микроскопа через объектив на образец (голубые стрелки), либо излучается сбоку (зеленая стрелка). Свет, отраженный образцом, в свою очередь, улавливается объективом. Микроскопия в падающем свете также возможна с непрозрачными образцами. Такие препараты распространены в материаловедении, например, когда образцы материала шлифуют и полируют или травят поверхности, которые затем исследуют под микроскопом. Освещение падающим светом через объектив также широко распространено в флуоресцентной микроскопии . Стереомикроскопы обычно работают с боковым падающим светом.

Боковое освещение (пурпурная стрелка) использовалось или используется в некоторых специальных процедурах (см. Щелевой ультразвуковой микроскоп и микроскопию светового диска ).

Структура типичного составного микроскопа проходящего света

Составной микроскоп в проходящем свете простой конструкции: A) окуляр , B) объектив , C) предметное стекло микроскопа, D) конденсор , E) предметный столик, F) осветительное зеркало

Компоненты типичного микроскопа проходящего света работают вместе следующим образом:

  • Объектива (В) создает действительное изображение , промежуточное изображение . Современные микроскопы обычно оснащены несколькими объективами, которые устанавливаются в револьверную головку объектива. Это позволяет быстро изменить цель поворотом башни.
  • Промежуточное изображение еще раз увеличивается окуляром (A). Плоскость промежуточного изображения обычно находится внутри окуляра. Общее увеличение микроскопа рассчитывается путем умножения увеличений объектива и окуляра. Многие окуляры имеют 10-кратное (10-кратное) увеличение. Частые увеличения объектива составляют от 10 × до 100 ×.
  • Трубка между объективом и окуляром называется трубкой .
  • Препарат (также: объект) обычно прикрепляется к предметному стеклу (C) в микроскопах проходящего света . Слайд прикреплен к столу для образцов (E).
  • Чтобы гарантировать, что свет, идущий снизу, оптимально освещает объект, микроскопы проходящего света имеют отдельную систему линз, конденсор (D). Это прикреплено к сцене.
  • Сцену можно перемещать вверх и вниз, чтобы сфокусироваться на объекте. Конденсатор перемещается вместе с ним.
  • Зеркало (F) служит источником света в старых и очень простых новых микроскопах. В противном случае используется электрический источник света.

Препарат можно осветить с помощью критического освещения или освещения Келера (см. Ниже).

Длина трубки, конечная оптика и бесконечная оптика

Путь луча в составном микроскопе с оптикой бесконечности.

Объективы старых или небольших микроскопов адаптированы к определенной длине трубки и создают реальное промежуточное изображение на точно определенном расстоянии, которое затем увеличивается с помощью оптики окуляра. Производители согласовали длину трубки 160 мм, у старых микроскопов эта длина трубки может отличаться. Компания Leitz / Wetzlar изготовила в соответствии с внутренним стандартом 170 мм.

Однако такая определенная длина трубки имеет некоторые недостатки. Оптические элементы и сборки нельзя просто вставить на путь луча, так как z. Б. просто для этого не хватило места. Поэтому новые микроскопы оснащены так называемой «бесконечной оптикой». В этом случае линза не создает реального промежуточного изображения, но свет выходит из линзы в виде бесконечных параллельных лучей, что позволяет получить «бесконечно» длинную трубку. Таким образом, на пути луча может быть вставлено любое количество промежуточных элементов, таких как фильтры, светоделители и т. Д. Поскольку параллельные лучи света не могут дать никакого изображения, на конце бесконечных трубок есть линза. Это создает реальное промежуточное изображение из параллельных световых лучей, которое затем может быть снова увеличено с помощью окулярной оптики. Бесконечные оптические линзы обычно можно узнать по значку ∞ ( символ бесконечности ) на них.

В отличие от бесконечной оптики, классическая оптика с фиксированной длиной трубки называется «конечной оптикой». Длина предполагаемой трубки указывается в миллиметрах на соответствующих линзах, около 160 или 170.

Прямые и инвертированные (также: инвертированные) микроскопы

Инвертированный микроскоп. Объективы расположены под образцом.

Микроскоп с объективом над образцом называется вертикальным микроскопом. В микроскопах проходящего света свет попадает на образец снизу. Вверху находится линза, через которую свет попадает в окуляр. Это более распространенный тип.

Если этот световой путь перевернут, мы говорим об инвертированном или инвертированном микроскопе. При освещении проходящим светом свет падает на образец сверху, а объектив располагается под ним. Затем для обеспечения комфортной работы свет отклоняется так, чтобы можно было смотреть в окуляры сверху (см. Рисунок).

Инвертированные микроскопы, например, для наблюдения за клеточной культурой - клетки, используемые, поскольку останавливают клетки на дне культурального сосуда. Расстояние от клеток до объектива было бы слишком большим при использовании вертикального микроскопа. Микроскопы такой конструкции являются незаменимым инструментом для исследования живых клеток в культуральных сосудах ( культурах клеток ), например Б. в технике патч-кламп , а также при использовании микроманипуляторов , подводимых к препарату сверху.

Подсветка препарата

Есть два распространенных метода освещения для яркого освещения поля зрения. Критическое освещение исторически старше. Он до сих пор используется в некоторых очень простых микроскопах. Освещения Келер разработан по августу Кёлер позволяет препарату освещаться более равномерно. Сегодня это стандарт в обычных и исследовательских микроскопах. Светлопольная микроскопия в проходящем свете с освещением Келлера обычно является отправной точкой для применения специальных методов светового микроскопа, таких как фазовый контраст и дифференциальный интерференционный контраст . Оба метода освещения были первоначально разработаны для микроскопии проходящего света в светлом поле, но также используются и в других методах, таких как флуоресцентная микроскопия.

Критическое освещение

При критическом освещении в плоскости подготовки создается уменьшенное изображение источника света. Если в качестве источника света используется лампочка, изображение нити накала в плоскости фокуса создается с помощью конденсора . Это гарантирует, что образец освещен с максимально возможной яркостью. Фокусное расстояние микроскопа конденсатора, как правило , довольно короткий. Чтобы получить изображение источника света в фокальной плоскости микроскопа, сначала необходимо расположить конденсор близко к образцу. Во-вторых, источник света должен находиться на сравнительно большом расстоянии от конденсора, чтобы он явно находился перед его передней фокальной плоскостью . Чтобы изображение нити накала не затрудняло распознавание структуры образца, на пути светового луча под конденсатором размещается фильтр из матового стекла. Если этого недостаточно, конденсор можно немного опустить, чтобы изображение нити накала получилось размытым.

Схема критического освещения с использованием лампы накаливания в качестве источника света. Чтобы использовать больше света от лампы, вскоре после нее можно установить коллектор (собирающую линзу).

Если для освещения используется не лампа, а зеркало для дневного света, оно обычно бывает плоским с одной стороны и полым с другой. Вогнутое зеркало может быть использовано для целей с низким увеличением , когда конденсатор был удален. При большем увеличении освещение должно конденсироваться на меньшей площади образца. Это делается с помощью конденсатора с помощью плоского зеркала . При дневном освещении конструкции из окружающей среды, такие как оконные рамы, могут быть показаны в критическом освещении. Здесь также может помочь матовый стеклянный фильтр под конденсатором или понижение конденсатора.

Köhler освещение

В конце 19 века Август Кёлер занимался микрофотографией , то есть фотографией с помощью микроскопа. При наблюдении непосредственно через окуляр неравномерная яркость поля зрения была сравнительно менее мешающей при критическом освещении, поскольку образец можно было перемещать вперед и назад по мере необходимости. Однако при микрофотографии неравномерное освещение приводило к низкому качеству изображения. Поэтому он разработал процесс, обеспечивающий равномерную яркость при такой же высокой общей яркости. Он опубликовал этот метод, который носит его имя сегодня, в 1893 году. Процесс настройки освещения Келера называется Келером.

Помимо освещения равномерного поля зрения, освещение Келера имеет еще одно преимущество: освещается только область образца, которая действительно наблюдается. Это позволяет избежать нежелательного рассеянного света, который может возникнуть в соседних областях. При таком освещении изображение источника света создается не в плоскости образца, а в плоскости диафрагмы под конденсатором. Это называется конденсаторной диафрагмой или апертурной диафрагмой. Напротив, изображение диафрагмы светового поля (также: полевой диафрагмы) резко отображается в плоскости препарирования. Эта апертура находится рядом с источником света, обычно она встроена в основание микроскопа. Изображение в плоскости образца фокусируется перемещением конденсора вверх или вниз. Освещение Köhler возможно только с искусственным источником света.

Запутанные пути луча в освещении Келера. См. Основной текст для пояснений.

Микроскоп Колера имеет два взаимосвязанных пути луча, и каждый из них имеет несколько «сопряженных плоскостей», то есть то, что находится в фокусе в одной из плоскостей, также находится в фокусе в других сопряженных плоскостях.

Путь луча изображения (нижний на приведенном выше рисунке) имеет следующие сопряженные плоскости (выделены голубым на рисунке): диафрагма светового поля (A), плоскость образца (B), промежуточное изображение ( C), сетчатка наблюдателя ( D). Для этого во время процесса Келерна микроскоп сначала фокусируется на наблюдаемых структурах в образце, чтобы они были резкими на промежуточном изображении и на сетчатке. Затем диафрагма светового поля, которая, как и диафрагма конденсатора , выполнена в виде ирисовой диафрагмы , сначала закрывается, а высота конденсора регулируется так, чтобы край диафрагмы светового поля также был показан в фокусе. При необходимости конденсор можно центрировать так, чтобы изображение апертуры диафрагмы светового поля находилось точно в центре поля зрения. Затем полевая диафрагма открывается ровно настолько, что ее край больше не виден.
Пути светового пучка (на чертеже выше) имеет следующие сопряженные плоскости (подсвечена голубым на чертеже): источник света (1), конденсатор диафрагмы (2), задней фокальной плоскости объектива (3), ученик наблюдатель (4).

Освещение Келера можно рассматривать как критическое освещение, в котором источником света является отверстие полевой диафрагмы.

Разрешение и увеличение

Объектив микроскопа: ахроматический с числовой апертурой 0,8 и 60-кратным увеличением
Объектив микроскопа в поперечном сечении: ахроматический с числовой апертурой 0,65 и 40-кратным увеличением

Если оборудование оптимально и используется масляная иммерсия , классическая световая микроскопия, в том виде, в котором она была разработана в XIX веке, в лучшем случае может различать объекты, расстояние между которыми составляет 0,2–0,3 мкм или более. Достижимое разрешение определяется не доступным качеством устройств, а физическими законами. Это зависит, помимо прочего, от длины волны используемого света .

Процессы, которые разрабатывались с 1990-х годов и основаны на нелинейных свойствах красителя, также допускают разрешение ниже этого так называемого предела Аббе .

Решающим фактором для способности микроскопа различать структуры мелких объектов (помимо контраста) является не увеличение, а разрешение . Это соотношение не следует понимать исключительно из соображений оптического излучения, но следует из волновой природы света. Эрнст Аббе был первым, кто осознал решающее влияние числовой апертуры на разрешение. Он дал как благотворное усиление

в. Это означает, что мельчайшие структуры, разрешенные линзой, все еще могут быть разрешены в глазу после визуализации через окуляр, то есть появляются под углом примерно 2 '( угловые минуты ). Если выбрано большее увеличение (например, при использовании окуляра с большим увеличением), изображение объекта отображается еще больше, но детали объекта не видны. Поэтому линзы и окуляры должны быть согласованы друг с другом.

По законам волновой оптики , разрешение светового микроскопа ограничено размером длины волны освещения, см. Числовую апертуру .

Резолюции за пределами предела Аббе

Сравнение разрешения конфокальной лазерной сканирующей микроскопии (вверху) и 3D SIM-микроскопии (внизу). Ядерные поры (анти-NPC, красный), ядерная оболочка (анти- ламин B , зеленый) и хроматин ( DAPI , синий) окрашивали одновременно в клетке мыши. Масштабная линейка соответствует 1 мкм.

В 1971 году Томас Кремер и Кристоф Кремер опубликовали теоретические расчеты по созданию идеальной голограммы для преодоления дифракционного предела, которая удерживает интерференционное поле во всех пространственных направлениях, так называемую голограмму.

С 1990-х годов было разработано несколько методов, которые позволяют оптическое разрешение выше предела Аббе. Все они основаны на флуоресцентной микроскопии и поэтому упоминаются в разделе этой статьи, посвященном процедуре с повышенным разрешением .

Следующие новейшие разработки в области световой микроскопии позволяют добиться разрешения, превышающего классический предел Аббе:

Метод получения контраста

Микроскопы специального назначения

  • Стереомикроскоп имеет отдельные лучевые пути для обоих глаз , которые показывают образец под разными углами , так что создается трехмерное впечатление.
  • Линии микроскоп является считывающим устройством на теодолите , угол измерительного прибора , используемом в съемке.
  • Хирургический микроскоп используется врачами в операционной.
  • Trichinoscope используются для обнаружения трихинеллы (круглых червей) при рассмотрении мяса.
  • Вибрации микроскоп используются для проверки вибрации струн в струнных инструментах.
  • Измерительный микроскоп имеет дополнительное устройство , которое позволяет образец для измерения.
  • Например, компьютерный микроскоп можно подключить к компьютеру с помощью USB- кабеля , который используется для отображения изображения.

история

Самый старый из сохранившихся рисунков, сделанный с помощью микроскопа: пчелы. Франческо Стеллути , 1630 год.
Составной микроскоп Роберта Гука , который он использовал для работы над своей Micrographia (1665) и с помощью которого он обнаружил клетки , представляет собой микроскоп отраженного света. Слева осветительный прибор, освещающий объект.

Принцип увеличения с использованием стеклянных чаш, наполненных водой, был описан еще римлянами ( Сенека ), а увеличительные линзы были известны еще в 16 веке.

Голландский производитель очков Ханс Янссен и его сын Захариас Янссен часто считаются изобретателями первого сложного микроскопа в 1590 году. Однако это основано на заявлении самого Захариаса Янссена середины 17 века. Дата сомнительна, потому что сам Захариас Янссен родился только в 1590 году. В 1609 году Галилео Галилей разработал Occhiolino , составной микроскоп с выпуклой и вогнутой линзами. Однако Захариас Янссен уже продемонстрировал устройство с тем же принципом действия годом ранее на выставке во Франкфурте . Микроскоп Галилея был отмечен « Академией рыси » в Риме, основанной в 1603 году Федерико Чези . Рисунок академика Франческо Стеллути 1630 года считается самым старым рисунком, выполненным с помощью микроскопа. На нем показаны три вида пчел (сверху, снизу и сбоку), а также увеличенные детали. Пчела появилась на гербе семьи Барберини , к которой принадлежал Папа Урбан VIII . Стеллути написал на баннере над иллюстрацией: « Для Urban VIII. Pontifex Optimus Maximus [...] из Академии рыси, и мы посвящаем этот символ вам с вечным почтением ».

Христиан Гюйгенс (1629–1695), также голландец, в конце 17 века разработал простую двухлинзовую окулярную систему. Он уже был скорректирован ахроматически , поэтому у него было меньше цветовых ошибок и, следовательно, это был большой шаг вперед в улучшении оптики микроскопа. Окуляры Гюйгенса производятся и сегодня, но визуально они значительно уступают современным широкопольным окулярам.

Даже Роберт Гук использовал свои опубликованные в 1665 году рисунки Micrographia в составном микроскопе (см. Рисунок). Самые сильные увеличения, которые он представил в своей книге, были 50-кратными. Большее увеличение было невозможно, потому что аберрации , возникающие в передней линзе (объективе) и в окуляре, умножались так, что не было видно более мелких деталей.

Однообъективный микроскоп, называемый микроскопом с винтовой трубкой Вильсона. Около 1760 г. Имеется более подробная легенда .

Поэтому Антони ван Левенгук (1632–1723) использовал другой подход. Чем больше изогнута линза, тем больше увеличение. Поэтому маленькие, примерно сферические линзы имеют наибольшее увеличение. Левенгук блестяще умел точно шлифовать самые маленькие линзы - техника, которая ранее была плохо освоена. Его простые микроскопы только с одной линзой были громоздкими в использовании, но, поскольку он использовал только одну линзу, не было необходимости умножать аберрации. Его микроскопы имели увеличение до 270 раз. Так Левенгук открыл то, что он назвал «анималкуленами», одноклеточными бактериями и простейшими.

В 1768 году Мишель Фердинанд д'Альбер д'Айи , герцог де Шолен (1714–1769) описал первый измерительный микроскоп, специально разработанный для измерительных целей .

В 1830 году Роберт Браун все еще использовал простой микроскоп и обнаружил ядро клетки и броуновское движение молекул . Прошло 160 лет, прежде чем составные микроскопы давали такое же качество изображения, как и простой микроскоп Левенгука.

Вплоть до XIX века хорошие составные микроскопы создавались методом проб и ошибок и основывались на опыте. Примерно в 1873 году Эрнст Аббе разработал физические принципы, необходимые для создания более совершенных микроскопов, которые действуют и сегодня. В результате впервые стало возможным изготовить объектив, предел разрешающей способности которого теперь ограничивается не качеством материала, а законами физической дифракции. Этот физический предел разрешения известен как предел Аббе. Соответствующие микроскопы производились совместно с Carl Zeiss в ее оптической мастерской . При этом они воспользовались оптическими очками, разработанными Отто Шоттом, и осветительным прибором, разработанным Августом Кёлером для освещения Кёлера .

Смотри тоже

литература

  • Йорг Хаус: Оптическая микроскопия . Wiley-VCH, Weinheim 2014, ISBN 978-3-527-41127-6 . 220 страниц.
  • Майкл Волгер (Ред .: Ирен К. Лихтшайдл): Световая микроскопия онлайн. Проверено 17 августа 2018 г. (Теоретическое введение и инструкции для практического применения в Венском университете. Также доступно в виде файла в формате pdf (270 страниц) .).
  • Дитер Герлах: Световой микроскоп. Введение в функции, обращение и специальные процедуры для врачей и биологов . 2-е издание. Георг Тиме Верлаг, Штутгарт 1985, ISBN 3-13-530302-0 .

веб ссылки

Викисловарь: световой микроскоп  - объяснение значений, происхождение слов, синонимы, переводы
Викиучебники: световая микроскопия  - учебные и учебные материалы

Как работают световые микроскопы:

Коллекции исторических световых микроскопов:

  • Музей оптических инструментов: Исторические микроскопы : Развитие конструкции научных микроскопов в Германии с рассказами об их производителях и пользователях, иллюстрированных более чем 3000 фотографиями
  • Музей микроскопа : история светового микроскопа от начала до наших дней в словах и изображениях. В галерее представлено более 100 микроскопов разных производителей.

Индивидуальные доказательства

  1. a b Джеральд Тернер: Микроскопы . Callwey Verlag, Мюнхен 1981, ISBN 978-3-7667-0561-7 , стр. 25-36 .
  2. Дитер Герлах: История микроскопии . Verlag Harri Deutsch, Франкфурт-на-Майне 2009, ISBN 978-3-8171-1781-9 , стр. 64-110, 171-179 .
  3. Герман Шахт: Микроскоп и его применение . Verlag GWF Müller, Берлин 1851, Глава: II.2.
  4. Zeiss Jena: Каталожный номер. 30: Микроскопы и вспомогательные микроскопические аппараты . Самостоятельно опубликовано, Jena 1895, p. 105 .
  5. a b c d e Дитер Герлах: Световой микроскоп. Введение в функции, обращение и специальные процедуры для врачей и биологов . Георг Тиме Верлаг, Штутгарт 1976, ISBN 3-13-530301-2 , стр. 64-71 .
  6. а б в г Йорг Хаус: Оптическая микроскопия, функциональность и методы контрастирования . John Wiley & Sons, 2014, ISBN 978-3-527-41286-0 , стр. 17–21 ( ограниченный предварительный просмотр в поиске Google Книг).
  7. Август Кёлер : Новый метод освещения для микрофотографических целей . В: Журнал научной микроскопии . Лента Х. , Нет. 4 , 1893, с. 433-440 (на сайте archive.org ).
  8. Эрнст Аббе: Вклад в теорию микроскопа и микроскопического восприятия. В: Архивы микроскопической анатомии. 9, 1873, стр. 413-468.
  9. Патент Германии DE 2116521 .
  10. ↑ План строительства 1978: Конфокальный лазерный сканирующий флуоресцентный микроскоп с высоким разрешением и глубиной резкости / 4-точечная голограмма (PDF; 83 kB).
  11. Компьютерный микроскоп : Лучшая веб-камера , test.de, 23 января 2003 г. (доступ онлайн 26 февраля 2013 г.).
  12. Стивен Джей Гулд : Лежащие камни Марракеша: Предпоследние исследования естествознания . С. Фишер, Франкфурт, 2003 г., ISBN 3-10-027813-5 , стр. 52-53 .
  13. Хьюго Фройнд, Александр Берг: История микроскопии. Жизнь и творчество великих исследователей . Том I: Биология . Umschau Verlag, Франкфурт-на-Майне 1963, стр. 4-5 .